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貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 包裝 | 單價(jià) | 貨期 | 庫存 |
JD200401131342 | 組氨酸-瓊脂糖凝膠 | -- | -- | 0元 | 咨詢客服 | 3天 |
性狀: | 組氨酸-瓊脂糖凝膠FF是一種將組氨酸鍵合在瓊脂糖微球上形成的親和層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了天然多糖化合物極好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu),與生物活性大分子有很好的相容性,具有高動(dòng)態(tài)吸附容量,快流速操作等特點(diǎn),適用于抗體等富含共軛氨基酸殘基的蛋白質(zhì)、多肽的分離純化。 1. 裝柱 1.1 根據(jù)分離目標(biāo)性質(zhì)配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。 1.2 將所取凝膠抽干,用初始緩沖液(按凝膠∶緩沖液=3∶1的比例)配成勻漿并脫氣。 1.3 將層析柱垂直固定,底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。 1.4 用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,水封層析柱,沉降過夜。 1.5 連結(jié)好柱子頂端活動(dòng)柱頭,打開蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)操作流速流過5柱體積,再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積,調(diào)節(jié)適配柱頭,使其盡量貼近膠面,最后用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。 注意:所有操作過程不能引入氣泡,保證裝膠的均勻度。 2. 平衡 將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導(dǎo)、pH等參數(shù)不變。平衡緩沖液可選擇中性pH的Tris-鹽酸、PBS、檸檬酸-檸檬酸鈉、巴比妥、醋酸-醋酸鈉等緩沖液。 3. 上樣 切換轉(zhuǎn)換閥進(jìn)行上樣,上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇,也可進(jìn)行線性實(shí)驗(yàn)找到最佳上樣量;樣品的預(yù)處理:用平衡液配制,0.45mm微孔濾膜過濾。 4. 沖洗 用2-3個(gè)柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導(dǎo)、pH等參數(shù)不變,此時(shí)未吸附的組分被清洗出去。 5. 洗脫 組氨酸-瓊脂糖凝膠FF的洗脫可用恒定洗脫、梯度洗脫或者階躍洗脫,一般推薦增大鹽濃度的梯度洗脫進(jìn)行。 6. 再生 用平衡緩沖液按操作流速?zèng)_洗3-5個(gè)柱體積。 若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。 7. 在位清洗(CIP) 含1mol/LNaCl的平衡緩沖液洗2個(gè)柱體積,0.1%TritonX-100洗2個(gè)柱體積,平衡緩沖液洗2個(gè)柱體積。 在位清洗可有效去除介質(zhì)上的雜質(zhì),同時(shí)介質(zhì)上的熱源也可基本去除。 |
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn): | 親和層析(affinity chromatography)是一種吸附層析,配體(或配基)和相應(yīng)的配基(或配體)發(fā)生特異性結(jié)合,而這種結(jié)合在一定的條件下又是可逆的。所以將配體(或配基)固相化后,就可以使存在液相中的相應(yīng)配基(或配體)選擇性地結(jié)合在固相載體上,借以與液相中的其他蛋白質(zhì)分開,達(dá)到分離提純的目的。親和層析具有高效、快速、簡便等優(yōu)點(diǎn) |
貯存: | 1. 包裝:聚胺酯瓶密封包裝,規(guī)格為25毫升、100毫升、250毫升和1升。 2. 貯存:20%乙醇,4°C冰箱保存。 3. 運(yùn)輸:4°C、常壓、避光。 4. 保質(zhì)期:5-10年。 |