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| 貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 包裝 | 單價 | 貨期 | 庫存 |
| JD200401131546 | 小麥凝集素-瓊脂糖凝膠 | -- | -- | 0元 | 咨詢客服 | 3天 |
| 性狀： | 小麥凝集素-瓊脂糖凝膠FF是一種將小麥凝集素配基鍵合在瓊脂糖微球上形成的親和層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了天然多糖化合物極好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，具有高動態(tài)吸附容量，快流速操作等特點，主要用于各種糖、糖蛋白、糖脂、帶N-乙酰葡糖胺殘基的各種蛋白等的分離純化。 1. 裝柱 1.1 根據(jù)分離目標性質(zhì)配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。 1.2 將所取凝膠抽干，用初始緩沖液（按凝膠∶緩沖液=3∶1的比例）配成勻漿并脫氣。 1.3 將層析柱垂直固定，底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。 1.4 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，水封層析柱，沉降過夜。 1.5 連結(jié)好柱子頂端活動柱頭，打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時操作流速流過5柱體積，再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積，調(diào)節(jié)適配柱頭，使其盡量貼近膠面，最后用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。 注意：所有操作過程不能引入氣泡，保證裝膠的均勻度。 2. 平衡 將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導、pH等參數(shù)不變。平衡緩沖液推薦pH為7.4，20mmol/LTris-HCl含有0.5mol/LNaCl（避免非特異吸附），并加入0.001mol/L的Mn2+或Ca2+。 3. 上樣 切換轉(zhuǎn)換閥進行上樣，上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進行選擇，也可進行線性實驗找到最佳上樣量；樣品的預(yù)處理：用平衡液配制，0.45mm微孔濾膜過濾。 4. 沖洗 用2-3個柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導、pH等參數(shù)不變，此時未吸附的組分被清洗出去。 5. 洗脫 小麥凝集素-瓊脂糖凝膠FF的洗脫可用pH4-6.5的硼酸緩沖液，硼酸可以與糖殘基結(jié)合，競爭性洗脫糖或糖蛋白。 6. 再生 用含0.5mol/LNaCl的pH為8.5和pH為4.5的緩沖液按操作流速分別沖洗3-5個柱體積，接著用平衡液洗到平衡3-5個柱體積。 若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。 7. 在位清洗(CIP) 對于強結(jié)合蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)，可采用以下流程進行在位清洗：pH為6.5的0.1mol/L硼酸緩沖液洗2個柱體積，20%乙醇洗2個柱體積，0.1%TritonX-100洗2個柱體積，平衡緩沖液洗2個柱體積。 在位清洗可有效去除介質(zhì)上的雜質(zhì)，同時介質(zhì)上的熱源也可基本去除。 |
| 質(zhì)量標準： | 親和層析（affinity chromatography）是一種吸附層析，配體（或配基）和相應(yīng)的配基（或配體）發(fā)生特異性結(jié)合，而這種結(jié)合在一定的條件下又是可逆的。所以將配體（或配基）固相化后，就可以使存在液相中的相應(yīng)配基（或配體）選擇性地結(jié)合在固相載體上，借以與液相中的其他蛋白質(zhì)分開，達到分離提純的目的。親和層析具有高效、快速、簡便等優(yōu)點。 |
| 貯存： | 1. 包裝：聚胺酯瓶密封包裝，規(guī)格為5毫升、25毫升、100毫升、250毫升和1升。 2. 貯存：20%乙醇，4°C冰箱保存。 3. 運輸：4°C、常壓、避光。 4. 保質(zhì)期：5-10年。 |
