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貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 包裝 | 單價 | 貨期 | 庫存 |
JD200401115020 | 谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠 | -- | -- | 0元 | 咨詢客服 | 3天 |
性狀: | 谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠FF是一種將谷胱甘肽鍵合在瓊脂糖微球上形成的親和層析分離介質。該產(chǎn)品保留了天然多糖化合物極好的親水性及大網(wǎng)架結構,與生物活性大分子有很好的相容性,具有高動態(tài)吸附容量,快流速操作等特點,主要用于谷胱甘肽轉移酶標記蛋白(GST融合蛋白)、谷胱甘肽轉移酶和谷胱甘肽依賴蛋白的分離純化。 1. 裝柱 1.1 根據(jù)分離目標性質配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。 1.2 將所取凝膠抽干,用初始緩沖液(按凝膠∶緩沖液=3∶1的比例)配成勻漿并脫氣 1.3 將層析柱垂直固定,底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。 1.4 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,使凝膠在柱內自由沉降,水封層析柱,沉降過夜。 1.5 連結好柱子頂端活動柱頭,打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時操作流速流過5柱體積,再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積,調節(jié)適配柱頭,使其盡量貼近膠面,最后用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。 注意:所有操作過程不能引入氣泡,保證裝膠的均勻度。 2. 平衡 將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導、pH等參數(shù)不變。平衡緩沖液可選擇pH為7.3,含0.1mol/LNaCl、1-10mmol/LDTT的PBS緩沖液。 3. 上樣 切換轉換閥進行上樣,上樣量根據(jù)樣品的性質和層析介質的量進行選擇,也可進行線性實驗找到最佳上樣量;樣品的預處理:用平衡液配制,0.45mm微孔濾膜過濾。 4. 沖洗 用2-3個柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導、pH等參數(shù)不變,此時未吸附的組分被清洗出去。 5. 洗脫 谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠FF的洗脫可用pH8含0.01mol/L還原態(tài)的谷胱甘肽的緩沖液中進行。 6. 再生 用平衡緩沖液按操作流速沖洗3-5個柱體積。 若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。 7. 在位清洗(CIP) 對于強結合蛋白質或脂類物質,首先采用0.05mol/LEDTA進行Ni2+的去除,接著可采用以下流程進行在位清洗:6mol/L鹽酸胍洗2個柱體積,70%乙醇或30%異丙醇洗2個柱體積,0.1%TritonX-100洗2個柱體積,平衡緩沖液洗2個柱體積。 在位清洗可有效去除介質上的雜質,同時介質上的熱源也可基本去除。 |
質量標準: | 1. 包裝:聚胺酯瓶密封包裝,規(guī)格為25毫升、100毫升、250毫升和1升。 2. 貯存:20%乙醇,4°C冰箱保存。 3. 運輸:4°C、常壓、避光。 4. 保質期:5-10年。 |