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增強型 DAB 顯色試劑盒是一種借助辣根過氧化物酶(HRP) ，用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或 Western、 Southern 、Northern、EMSA 等膜顯色的試劑盒。 DAB（二氨基聯(lián)苯胺）是辣根過氧化物酶的常用底物。在 辣根過氧化物酶的催化下，DAB 會產生棕色沉淀。該棕色沉淀不溶于水和乙醇。 本產品采用特殊配方，靈敏度高，背景低，重復性好，儲存穩(wěn)定，使用方便，適合于蛋白印跡、免疫組織 化學和免疫細胞化學、斑點印跡和生物芯片等的染色和顯色反應。

1. 對于組織切片或蛋白質印記膜，在與辣根過氧化物酶（HRP）標記的抗體或其它形式的探針孵育后，用適 當洗滌液洗滌 3-5 次，每次 3-5 分鐘。

2. 向 5 ml 蒸餾水中加入 250 μl 溶液 A、250 μl 溶液 B、250 μl 溶液 C，并混合均勻，即為 DAB 工作液，1h 內使用。注意：溶液 A/B/C 必須完全融化后使用。

3. 向組織切片或膜上加入適量 DAB 工作液，確保能充分覆蓋樣品。

4. 室溫避光孵育 1-30 分鐘，顯色時間過長可引起本底增高，故應密切觀察顯色過程（一般 3-10 分鐘最理想）， 并在本底較淺且達到適當顯色強度時以流水漂洗終止顯色反應。

5. 對于組織切片或細胞樣品，顯色反應終止后可對其進行其他染料復染。對于膜，顯色反應終止后，可以室 溫晾干避光保存。

注意事項：

1．DAB 溶液應低溫密封保存。如有結晶析出，應確保結晶完全溶解再行使用；

2．顯色工作液應現(xiàn)用現(xiàn)配，新鮮配制的工作液應為無色或淺棕色，如顏色過深，請勿使用；

3. DAB 在常溫下不穩(wěn)定，每次取用后均應及時加蓋密封放回冰箱，以免因 DAB 分解影響實驗，或因滲 漏造成實驗環(huán)境污染。

4. DAB 有潛在致突變作用，操作時應注意穿戴好防護用具。

5. DAB 溶液 C 成分為 H2O2,該組分易降解，必要時可自行配備。