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Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒
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分子式： -- 分子量： --
貨號(hào) 品名 規(guī)格 包裝 單價(jià) 貨期 庫(kù)存
JD1227173912 Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒 -- 2500微孔(250T) 247.5元 現(xiàn)貨 3天
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性狀： 組成 包裝（2500微孔) 保存
    5×G250染色液 100ml 2-8℃
    PBS稀釋液 30ml 2-8℃
    蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml BSA) 1ml -20℃

本試劑盒自訂購(gòu)之日起九個(gè)月內(nèi)有效。
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)： 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
    考馬斯亮蘭G-250染料，在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合，使染料的最大吸收峰的位置（lmax），由465nm變?yōu)?95nm，在一定的濃度范圍內(nèi)，測(cè)定的吸光度值A(chǔ)595，與蛋白質(zhì)濃度成正比。Bradford法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M，二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢劑的樣品推薦使用生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒。

操作說(shuō)明：
一.微孔酶標(biāo)儀法
    1. 完全溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取10ml，稀釋至250ml ，使終濃度為0.2mg/ml。待測(cè)蛋白樣品在什么溶液中，標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡(jiǎn)便起見(jiàn)，也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
    2. 5×G250染色液使用前請(qǐng)顛倒3-5次混勻，取1ml  5×G250染色液，加入4ml雙蒸水，混勻成 1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
    3. 將標(biāo)準(zhǔn)品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分別加到96孔板中，加PBS稀釋液補(bǔ)足到20微升。
    4. 將樣品作適當(dāng)稀釋?zhuān)ㄗ詈枚嘧鰩讉€(gè)梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋?zhuān)?，?0微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時(shí)的誤差，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確，所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。
    5. 各孔加入200微升稀釋后的1×G250染色液，室溫放置3-5分鐘。
    6. 用酶標(biāo)儀測(cè)定A595，或560-610nm之間的其它波長(zhǎng)的吸光度。
    7. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。

二.分光光度計(jì)法
如沒(méi)有酶標(biāo)儀，可用分光光度計(jì)在離心管中混勻后加入比色皿中比色。