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本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統(tǒng)，提取組織和細胞的基因組DNA。 離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司特有新型材料，能夠高效、專一吸附DNA，可最大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。 提取的基因組DNA片段大，純度高，質量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作，包括酶切、 PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。

操作步驟：

使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入休積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1、樣品的處理：

a、細胞：取1×106-1×107個懸浮培養(yǎng)細胞，12000rpm離心1min收集細胞，貼壁細胞先用胰蛋白酶消化處理，再用預冷的PBS吹打成細胞懸液，然后12000rpm離心1min收集細胞，盡量除去上清，加200ul溶液A，振蕩至徹底混勻。

b、組織：組織量不宜過大，一般不要超過25mg，可以使用勻漿器勻漿，最好用液氮研磨成粉末狀，再用預冷的PBS或無菌水充分懸浮，然后12000rpm離心1min收集細胞，盡量除去上清，加200ul溶液A，振蕩至徹底混勻。

2、向懸浮液中加入20ul 的RNase A (10mg/ml)，55℃放置15min。

3、加入20ul 的蛋白酶K( 10mg /ml )，充分顛倒混勻，55℃水浴消化，細胞消化時間較短，組織消化時間較長，一般需要1-3個小時才能完成（鼠尾需要消化過夜）。消化期間可顛倒離心管混勻數次，直至樣品消化完全為止。消化完全的指標是：液體清亮及粘稠。

4、加入200ul體積溶液B，充分顛倒混勻，如出現白色沉淀，可放置于75℃ 15-30min，沉淀即會消失，不影響后續(xù)實驗。如溶液未變清亮，說明樣品消化不徹底，可能導致提取的DNA量少及不純，還有可能導致堵塞吸附柱。

5、加入200ul無水乙醇，充分混勻，此時可能會出現絮狀沉淀，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中。

6、12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)， 12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

8、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

9、12000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR等。

10、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50-200ul經65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心2min。

11、可將離心所得洗脫液再加入吸附柱中，12000rpm離心2min，即可得到高質量的基因組DNA。